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血細胞分析儀具有快速、方便、重復(fù)性好、工作效率高等特點。目前各大、中醫(yī)院檢驗科已廣泛應(yīng)用。但血細胞分析儀測定血小板計數(shù)，常會出現(xiàn)結(jié)果誤差，這是臨床經(jīng)常遇到的問題。為此，本文主要對血細胞分析儀計數(shù)血小板的影響因素進行分析，旨在為臨床提供可靠的診斷依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 儀器:采用的儀器是日本Sysmex公司生產(chǎn)的KX-21型全自動血細胞分析儀。
1.2 試劑 ① 儀器用的稀釋液、清洗液、溶血劑均由日本Sysmex公司提供。② 顯微鏡計數(shù)用的血小板稀釋液按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）配制，冰箱保存。 ③EDTA-K2抗凝劑
1.3 標本來源 選自2008年1月-2008年12月本院門診及住院的血小板結(jié)果異常的血標本共207例，另挑選血小板結(jié)果正常的血100作對照。
1.4 用EDTA-K2抗凝全血2ml，充分混勻后，2小時內(nèi)KX-21型全自動血細胞分析儀檢測，取血小板檢測結(jié)果異常的血標本，同時用顯微鏡手工計數(shù)，另取血小板檢測結(jié)果正常的血標本100例同時用顯微鏡手工計數(shù)，比較兩法結(jié)果。
2 結(jié)果
血小板少于100×109／L的血標本121例，為A組；血小板大于300×109／L的血標本86例，為B組；lind板在100~300×109／L的血標本100例，為C組，其兩法測定結(jié)果如表1所示。
3 討論
3.1 在Sysmex X-21型全自動血細胞分析儀檢測中，由于紅細胞和血小板的計數(shù)是在同一通道中進行，且它們之間僅以體積大小來區(qū)別，因此，血小板的計數(shù)易受小紅細胞數(shù)量或紅細胞碎片的影響，由于血液中小紅細胞的數(shù)量遠大于血小板數(shù)量，即使有少量的小紅細胞混入血小板計數(shù)范圍內(nèi)，也會對血小板計數(shù)造成很大的影響。在血小板直方圖右側(cè)下降后繼而抬高呈駝峰樣改變，血片油鏡檢查顯示紅細胞較小或紅細胞碎片較多，兩種方法血小板計數(shù)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）.
3.2 由于血小板的特點易于粘附、聚集。李永紅等認為采血是否順利是造成血小板偏低的的一個重要原因。采血過程中因操作緩慢，穿刺不順且組織受損后，組織凝血因子易混入血標本，混勻不及時等均可促成血小板聚集，從而產(chǎn)生肉眼看不見的小凝塊，這是血細胞分析儀測定血小板結(jié)果偏低的常見原因之一。這時血片鏡檢可見血小板聚集成堆。遇到這種情況應(yīng)重新采血測定。
3.3 某些血液病可造成血小板數(shù)真正減少，如骨髓巨核細胞生成不良（如障）；血小板破壞增加（如DIC、IPT）;血小板分布異常（如脾大）等。
3.4 標本放置時間過長、試劑質(zhì)量、地線、電源和藥物等因素均能對血小板的計數(shù)造成一定程度的影響，因此檢測過程中應(yīng)盡可能排除各種因素的干擾，以使血小板計數(shù)可靠，為臨床診斷治療提供有參考意義的數(shù)據(jù)。
參考文獻
［1］ 趙紅燕.血液細胞儀測定血小板計數(shù)結(jié)果的分析.上海醫(yī)學檢驗雜志，1998.1.3（2）：27
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［3］ 詹靈凌，秦雪、林發(fā)全等。血細胞分析儀計數(shù)血小板的影響因素分析與糾正，廣西醫(yī)科大學學報，2004.21（5）:763-764。
［4］ 李永紅、鐘步云。血細胞分析儀測定血小板結(jié)果偏低的原因及糾正方法。臨床檢驗雜志，2001.192:112.
【關(guān)鍵詞】血常規(guī)分析儀；比對
由于具檢測結(jié)果準確、精密度高、操作簡便等特點，血細胞分析儀在檢驗醫(yī)學領(lǐng)域的應(yīng)用愈來愈廣泛，但因不同品牌或同一品牌不同型號的血細胞分析儀的測定原理及方法存在相異之處，可引致測定結(jié)果出現(xiàn)差異。本文參考美國臨床和實驗室標準化協(xié)會頒布的EP9-A2文件[1]和國際血液學標準化委員會文件[2]本實驗室所使用的4臺血細胞分析儀測定結(jié)果執(zhí)行比對試驗，以確保為臨床疾病診療提供準確、可比的血液學檢驗數(shù)據(jù)。
1資料和方法
1.1材料
1.1.1儀器和試劑四臺血細胞分析儀分別為：sysmex XE-2100i、sysmex 1800i、sysmex800i、日本光電。所用試劑均為相應(yīng)廠家配套試劑，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。
1.1.2質(zhì)控物均為原裝配套質(zhì)控物。
1.1.3抗凝管及新鮮抗凝全血[3]乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝真空采血管購自美國BD公司，抗凝新鮮全血來自健康體檢者或住院患者。
1.2方法
1.2.1實驗方法
1.2.1.1檢驗人員熟悉每一檢測系統(tǒng)的各個實驗環(huán)節(jié)，熟悉評價方案。
1.2.1.2以sysmex 1800i血細胞分析系統(tǒng)為比較系統(tǒng)，sysmex XE-2100i、sysmex800i、日本光電血細胞分析系統(tǒng)為實驗系統(tǒng)。實驗系統(tǒng)和比較系統(tǒng)分別測定質(zhì)控物，各項指標在控后檢測實驗樣本。
1.2.1.3每天檢測1份樣本，且在抽血后2小時內(nèi)完成檢測，連續(xù)檢測30天，共檢測30份樣本。
1.2.2統(tǒng)計學分析計算每一項目在每臺儀器上雙份測定的均值，以sysmex 1800i為比較儀器，采用SPSS12軟件建立回歸方程。依據(jù)已建立的回歸方程，并求出最大偏倚。
2結(jié)果
三臺比對機與標準機血細胞分析儀檢測結(jié)果，經(jīng)統(tǒng)計分析，相關(guān)性顯著，r2均大于0.95，說明三臺儀器在5項指標上均有非常高的優(yōu)擬合度。最大偏倚結(jié)果均在美國CLIA，88能力驗證分析質(zhì)量要求范圍內(nèi)，見表1。
3討論
目前，許多醫(yī)院都有數(shù)臺血細胞分析儀，同一檢驗項目在不同儀器上的檢測結(jié)果可能存在偏差，如何保證不同檢測系統(tǒng)間檢驗結(jié)果的一致性、準確性及穩(wěn)定性是目前醫(yī)學界關(guān)注和討論的熱點[4]。不同血細胞分析儀對同一檢驗結(jié)果的可比性是檢驗質(zhì)量管理的最終目標，因此，工作中應(yīng)重視實驗室內(nèi)檢測系統(tǒng)的比對，確定比對方案并嚴格操作規(guī)程。目前許多檢測系統(tǒng)比對試驗是采用統(tǒng)計學t檢驗進行方法學比對評價，兩臺儀器檢驗結(jié)果經(jīng)t檢驗，若差異無統(tǒng)計學意義，即認為2個檢測系統(tǒng)有很好的可比性。然而，這種驗證方法不夠規(guī)范[5]。《檢測和校準實驗室能力的通用要求》（GB/T15481-2000、ISO/IEC10725-1999）和《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》（ISO15189-GB/T22576）這2個國際標準對檢驗結(jié)果的可溯源性和可比性均有明確要求，強調(diào)比對試驗是實現(xiàn)準確度溯源和患者標本檢驗結(jié)果可比性的重要途徑。而比對試驗則要參考CLSI-EP9-A2文件，用回歸統(tǒng)計法分析不同系統(tǒng)的SE%和醫(yī)學決定水平處的SE%。以1/2CLIA，88TEa為標準，判斷檢測系統(tǒng)的可比性即為臨床可接受水平[6]。筆者嚴格按照CLSI‐EP9‐A2文件要求，在保證兩臺儀器精密度和穩(wěn)定性良好的條件下，對其進行WBC、RBC、Hb、PLT、HCT5項檢測結(jié)果的方法學比對和評估，以比對方法為橫坐標，試驗方法為縱坐標，再進行均值散點圖的離群值檢查、相關(guān)回歸分析以及可接受性評估。本研究結(jié)果表明，四臺儀器具有良好的可比性，SE%在允許范圍內(nèi)，本組比對試驗結(jié)果可以接受。另外，在實驗中要注意方法學的比較必須與臨床相結(jié)合，實驗時選擇的數(shù)據(jù)要圍繞醫(yī)學決定水平，并統(tǒng)計各個水平的系統(tǒng)誤差。若某項目只有一個臨床決定水平，需估計在實驗數(shù)據(jù)均值附近的SE%。從r值及其與1/2CLIA′88TEa比較等方面，綜合評估不同儀器檢測同一項目結(jié)果間的準確性和一致性，從不同角度評估檢測結(jié)果更為科學、客觀。各實驗室熟悉儀器的技術(shù)人員應(yīng)定期對不同檢測系統(tǒng)的結(jié)果進行分析、評價，確保檢驗結(jié)果穩(wěn)定、準確、可靠。
參考文獻
[1]National Committee for Clinical Laboratory Standarda.EP9-A2：Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Sample；Approved guideline-second edition[S].Wayne，PA：NCCLS，2002.
[2]England JM，Roman RM，Van Assendeft OW，et al.Protocol for evaluation of automated blood cell counters[J].Clin Lab Haematol，1984，（1）：69-84.
[3]彭黎明，李麗娟，彭志勇，等.幾種血細胞分析儀結(jié)果的比對和質(zhì)控[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2000，23（2）：94-97.
[4]汪艷，朱敏，張靜.同型號全自動細胞分析儀的比對試驗[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2010，31（2）：166-167.
【關(guān)鍵詞】 全血細胞分析儀； 比對試驗； 分析研究
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.05.047
全血細胞分析是臨床常用的參考指標，其檢測值直接指導著臨床工作，對疾病的診斷與治療有著重要的意義[1]。隨著臨床工作量不斷增加，絕大多數(shù)縣級以上醫(yī)院都已擁有2臺以上不同型號的血細胞分析儀。此次，為了驗證同一制造商不同型號血細胞分析儀各項參數(shù)檢測結(jié)果之間的準確性、差異性和一致性，規(guī)范多臺血細胞分析儀之間比對試驗的操作，按照衛(wèi)生部和新疆維吾爾自治區(qū)臨檢中心參比實驗室的規(guī)范要求，對筆者所在醫(yī)院實驗室內(nèi)3臺全血細胞分析儀進行了比對分析研究。
1 材料與方法
1.1 材料 標本采用來筆者所在醫(yī)院就診的隨機門診患者新鮮抗凝全血。儀器類型為XT-1800I、XT-1800I、BC-3000（3臺儀器均為日本 SYSMEX公司生產(chǎn)）。全套試劑均為SYSMEX公司提供的原裝配套試劑。
1.2 方法
1.2.1 技術(shù)要求 由經(jīng)技術(shù)培訓合格的專業(yè)人員按相關(guān)操作流程進行操作。
1.2.2 對比試驗方法 以1臺經(jīng)校準并驗證合格的XT-1800I作為本室的基準儀器，XT-1800I、BC-3000作為比對儀器。每天隨機選擇10份經(jīng)EDTA-K2抗凝的新鮮全血標本 (包括高、中、低值)，分別在3臺儀器上嚴格按操作說明書進行測定，每份標本連續(xù)測定2次，記錄WBC、RBC、HGB、HCT、PLT的結(jié)果，再將連續(xù)測量15 d的各項數(shù)據(jù)進行計算，求出均值和CV值，制成對比表格[2]。
1.2.3 參比實驗室標準 即WBC≤±3.9%、RBC≤±2.4%、HGB≤±2.1%、HCT≤±2.1%、PLT≤±6.8%。
2 結(jié)果
通過統(tǒng)計試驗數(shù)據(jù)，求取數(shù)據(jù)平均值，3臺血液分析儀之間所有檢測樣本各項參數(shù)的變異系數(shù)（CV）最大值相差分別是：WBC≤±3.92%、RBC≤±0.57%、HGB≤±1.76%、HCT≤±0.77%、PLT≤±1.59%。
在多次比對試驗中，僅發(fā)現(xiàn)XT-1800I 的WBC出現(xiàn)了一次 CV值超出標準CV≤±3.9%（即比對儀器的WBC≤±3.92%），其他各項目檢測指標的變異系數(shù)（CV值）以及在不同血細胞分析儀上的偏差（變異系數(shù) CV%），均符合參比實驗室的標準和要求。
3 討論
從比對結(jié)果來分析，此次筆者所在醫(yī)院實驗室內(nèi)XT-1800I、XT-1800I、BC-3000（日本 SYSMEX公司生產(chǎn)）3臺儀器精密度均很高，其測量結(jié)果重復(fù)性好，變異系數(shù)均較小，偏倚度小，實驗儀器與參比儀器檢測結(jié)果有很好的相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學意義[3]。其中1臺XT-1800I的WBC出現(xiàn)1次CV值超出標準，可能是由于機器使用頻率高(24 h開機)、標本量大，致使儀器耗損，導致WBC檢測結(jié)果不穩(wěn)定。而同類的各臺儀器之間的可比性則較強，結(jié)果的一致性較好[4]。
隨著醫(yī)療事業(yè)和診療技術(shù)的不斷發(fā)展及改進，各種先進的檢驗儀器和新的項目正逐漸應(yīng)用于臨床。臨床和患者也在不斷的對檢驗科提出更高的要求，需要檢驗工作者為臨床提供更為豐富的診斷指標、更加便捷和快速的檢測方法、更加低廉的檢測費用，但最重要的是提供更準確的數(shù)據(jù)。為了保證檢測結(jié)果的準確性、可靠性和快捷，目前檢驗科亟待解決的問題就是要進一步完善實驗室質(zhì)量管理，規(guī)范標準化的操作程序，重視加強并規(guī)范檢驗人員的技術(shù)培訓。通過定期對不同型號但同類的檢驗儀器進行新鮮全血的校準和比對試驗，根據(jù)判定規(guī)則，當比對儀器檢測結(jié)果超出允許范圍時，用標準儀器定值新鮮全血，再用定值新鮮全血校準比對儀器，這樣使比對儀器和標準儀器具有同一溯源性[5]。保證儀器的性能質(zhì)量和各項參數(shù)的準確更加準確穩(wěn)定，才是保證血液分析儀檢驗質(zhì)量可靠性的重要措施。
參 考 文 獻
［1］ 熊立凡.臨床檢驗基礎(chǔ)［M］.第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006:80-81.
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［3］ 徐朝，李軍，蔣芬，等.多臺全自動血細胞分析儀檢測結(jié)果比對方法的建立［J］.中國健康月刊，2011（5）:65-66.
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血小板計數(shù)是血液常規(guī)檢驗的重要項目之一，在臨床檢驗工作中，常發(fā)現(xiàn)少數(shù)病人經(jīng)全自動血細胞分析儀進行血小板檢測時，血小板測定值常不準確，血小板數(shù)值與臨床癥狀不相符，為探討其發(fā)生原因，本文對120例健康人血標本進行重復(fù)監(jiān)測，尋找血細胞分析儀計數(shù)血小板的準確性及重復(fù)測定的可比性及影響因素。
1.材料與方法
1.1儀器
深圳邁瑞公司生產(chǎn)的BC-5500血液分析儀。
1.2試劑
BC-5500專用配套試劑（溶血劑、稀釋液、清洗液）。
1.3其他
校準物與質(zhì)控液，全血校準液（由深圳邁瑞公司提供），全血質(zhì)控物（由青海省臨檢中心提供）。
1.4方法
1.4.1按儀器維護保養(yǎng)要求，對儀器進行全面的維護，經(jīng)常保持微孔的清潔，以保證BC-500在正常條件下批內(nèi)重復(fù)測定變異數(shù)（RCV）在規(guī)定范圍內(nèi)，每次實驗前血液分析儀用全血校準物校準儀器后，嚴格按儀器操作步驟進行測試。
1.4.2用含EDTA-K抗凝管，采集120例健康人靜脈血2ml，輕輕混勻后，立即在血液分析儀BC-500上測定3次，然后分別于5、10、20、30、60min各測3次，并用全血質(zhì)控物質(zhì)同步監(jiān)測儀器，分別計算其均值，按時間分組，分別利用多樣本均數(shù)間顯著性檢驗與配對t檢驗進行統(tǒng)計學分析。
2.結(jié)果
2.1標本自身因素的影響
由于采血過程不順利，過分擠壓或未充分與抗凝劑混勻等因素人為造成血小板的凝集，是造成血小板計數(shù)不準確的首要原因。
2.2標本放置時間的影響
WBC在采血后0―30min內(nèi)隨時間延長其數(shù)量不規(guī)則遞減，組與組之間差異有顯著性（P
2.3血小板聚集分可逆聚集和不可逆聚集
當新鮮靜脈血加入EDTA―K2：抗凝瓶混勻后血小板即發(fā)生聚集反應(yīng)，此時立即進行全血細胞測定，可逆聚集的血小板還沒有解聚，會造成全血細胞分析結(jié)果誤差。白細胞不同程度假性升高，直方圖的小細胞群會出現(xiàn)一個很高的截距，血小板不同程度的假性降低，直方圖就會出現(xiàn)鋸齒波或尾部抬高。但抗凝血靜置30min后，再進行測定，即可消除上述假性結(jié)果。100例靜脈血放置不同時間各參數(shù)的均值比較可看出60min與30min測定值差異無顯著性（P>0.05），30min與20min測定值差異有顯著性（P
3.討論
BC-5500型血細胞分析儀計數(shù)血小板的原理是直接計數(shù)2―20fl范圍內(nèi)的血小板，根據(jù)正態(tài)分布理論，用電子擬合線擬合0―70fl范圍內(nèi)的血小板數(shù)量作最終報告結(jié)果，具有雙曲線的血小板直方圖是它的標準結(jié)果，只具有單曲線的血小板直方圖，只要成正態(tài)對數(shù)分布，曲線在20fl范圍內(nèi)有明顯的主峰，其儀器計數(shù)法與顯微鏡計數(shù)法較一致，與臨床基本吻合[1]。血小板膜分內(nèi)膜和外膜，外膜圍繞胞質(zhì)形成漿膜，并延伸到胞質(zhì)內(nèi)部并折疊形成開放微小管系統(tǒng)，它是血小板攝取和釋放的通道。質(zhì)膜內(nèi)側(cè)附著許多微絲，其主要成分為肌動蛋白的肌凝蛋白，與微管環(huán)周束共同支持偽足的形成。當新鮮靜脈血離體加入EDTA―K抗凝瓶內(nèi)，管壁周圍的全血外環(huán)境及溫度發(fā)生改變，使血小板形態(tài)發(fā)生變化[2]。由于血小板發(fā)生聚集，在阻抗法做血小板計數(shù)時，聚集體所產(chǎn)生的脈沖大于儀器預(yù)設(shè)的單一血小板脈沖值，因而就不會計數(shù)血小板結(jié)果內(nèi)，從而使血小板數(shù)量減少。
故血小板聚集的原因可能有：
（1）抗凝劑EDTA―K2：能使血小板形態(tài)發(fā)生改變。由盤狀變成球狀，從而使可逆聚集血小板的偽足回縮到血小板胞質(zhì)內(nèi)，血小板相互纏繞的偽足就可解除。
（2）可逆聚集的血小板由于形態(tài)有所改變及偽足的形成，增大了血小板表面積，其表面負電荷相應(yīng)增大，同性電荷的排斥力也就相應(yīng)增強。
（3）溫度升高，分子運動速度越快，溫度對可逆聚集血小板解聚的影響尤其在用預(yù)稀釋方法作全血細胞測定中更為明顯。
（4）溶血劑的加入量、溶血時間和儀器檢測的清潔度有關(guān)，因此必須保持微孔的清潔，才能保證儀器測定的可靠性。原因：經(jīng)EDTA―K2抗凝的全血標本，在采血30min后進行全血細胞分析，可提高結(jié)果的準確性。但需排除化療、血小板減少性紫癜、白血病及造血系統(tǒng)異常等疾病。血小板形態(tài)不規(guī)則且細小，任何灰塵和斑點都會影響計數(shù)。反復(fù)使用的測定管極易引起雜質(zhì)吸附，造成殘余溶血素污染，從而引起PLT計數(shù)偏高。血細胞分析儀檢測血小板的準確性取決于很多因素，環(huán)境、溫度、抗凝劑混合情況以及所有影響電脈沖大小及數(shù)目的因素都會影響正確計數(shù)。因此，只有正確操作，排除各種干擾，才能使血小板的計數(shù)結(jié)果準確靠。
參考文獻：
關(guān)鍵詞 血細胞分析儀 檢測結(jié)果 比對試驗
隨著檢驗醫(yī)學的快速發(fā)展，全自動血細胞分析儀在醫(yī)學實驗室得到廣泛使用，但由于其品牌種類多，同一實驗室可同時擁有多臺不同型號、不同分析原理的血細胞分析儀，導致同一血液標本在不同儀器之間測定的結(jié)果不可避免的會存在系統(tǒng)誤差。為了解兩臺血細胞分析儀的性能，并為今后的室內(nèi)及室間質(zhì)量控制方案做準備，保證兩臺血細胞分析儀測定結(jié)果的準確性和可比性，根據(jù)1984年國際血液學標準化委員會（ICSH）公布的關(guān)于全自動血細胞分析儀評價的文件［1］，使用標準全血質(zhì)控品及患者新鮮全血標本在不同型號的血細胞分析儀上進行了WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5個主要項目的檢測，對所檢測的結(jié)果進行比對分析，現(xiàn)將比對結(jié)果報告如下。
資料與方法
標本來源：每天隨機抽取本院門診和住院患者血液標本20例，空腹靜脈血1.5ml，用EDTA-K2抗凝。儀器：Sysmex XS-800i型血細胞分析儀，倍肯公司AC-920型血細胞分析儀。試劑：稀釋液、溶血劑、清洗液等均采用原裝進口配套試劑。質(zhì)控液：全血細胞質(zhì)控品，由新成生物有限公司提供。
方法：實驗前首先對兩臺儀器進行日常維護，保證儀器的工作環(huán)境及運行狀態(tài)在正常狀態(tài)，再用血細胞分析儀的校準液對分析儀的主要參數(shù)進行校準，然后用質(zhì)控液在Sysmex XS-800i型血細胞分析儀和瑞典倍肯公司AC-920型血細胞分析儀兩臺血細胞分析儀上分別進行檢測，并使用患者的新鮮全血樣本在兩臺儀器上分別進行檢測，使用質(zhì)控液所測定的WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5個項目的檢測結(jié)果來評價兩臺血細胞分析儀的批內(nèi)、批間精密度。
儀器穩(wěn)定性監(jiān)控：每臺儀器每天以全血質(zhì)控物做室內(nèi)質(zhì)控（批間精密度），分別計算參數(shù)WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
儀器精密度測定：取正常人新鮮抗凝靜脈血1份，分別在每臺儀器重復(fù)測定10次，計算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值，SD和CV。
結(jié) 果
精密度測定：①批內(nèi)精密度：用質(zhì)控液在每臺血細胞分析儀上連續(xù)測定20次。兩臺血細胞分析儀的測定結(jié)果和批內(nèi)精密度均在質(zhì)控品參考范圍內(nèi)，經(jīng)t檢驗，測定結(jié)果之間的差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。②批間精密度：將質(zhì)控液每日隨機插入常規(guī)標本中在每臺血細胞分析儀上檢測1次，連續(xù)20天作為每臺儀器的批間精密度。兩臺血細胞分析儀的檢測結(jié)果和批間精密度均在質(zhì)控品參考范圍內(nèi)［2］，經(jīng)t檢驗，兩臺儀器檢測結(jié)果差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
隨機取門診和住院患者EDTA-K2抗凝全血標本20份，同時在兩臺血細胞分析儀上分別檢測兩次取其平均值。將兩臺血細胞分析儀測定的同一檢測項目的結(jié)果進行配對t檢驗（P＞0.05），說明兩臺儀器檢測的各項檢驗結(jié)果間的差異無統(tǒng)計學意義。
討 論
血紅蛋白含量的測定是在被稀釋的血液中加入溶血劑后，使紅細胞釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)，在特定波長（一般在530～550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比例，儀器便可顯示Hb濃度。不同系列的血液分析儀配套溶血劑配方不同，形成的血紅蛋白衍生物也不同，但大多數(shù)的最大吸收光譜接近540nm。近年來許多高檔的分析儀上采用了激光散射法進行單個血紅細胞血紅蛋白的分析，以盡量減少高WBC、乳糜血、高膽紅素等對HBG比色的影響。
Sysmex XS-800i型血細胞分析儀利用光檢測器模塊應(yīng)用流式細胞計數(shù)法進行白細胞分析和五分類分析，紅細胞檢測器利用流體聚焦法進行紅細胞和血小板計數(shù)，血紅蛋白檢測器利用SLS血紅蛋白檢測法來分析血紅蛋白。分析模式可采用手動模式和毛細管模式，為保證結(jié)果的準確性，定期對儀器進行校準，并且每天用全血質(zhì)控品進行室內(nèi)質(zhì)量控制分析，定期參加室間質(zhì)量評價活動，通過長期使用發(fā)現(xiàn)Sysmex XS-800i型血細胞分析儀的檢測結(jié)果重復(fù)性好，準確性高，具備完善的質(zhì)量控制程序，儀器性能優(yōu)良，室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良，可以為臨床提供準確、快速、及時的血細胞分析檢測數(shù)據(jù)。
AC-920型血細胞分析儀利用電阻抗法進行白細胞、紅細胞和血小板的檢測，用光吸收法進行血紅蛋白的檢測，可采用預(yù)稀釋模式和抗凝全血兩種模式進行檢測，可對白細胞進行三分類分析，尤其對于不易采血的嬰幼兒可采取末梢血稀釋后進行檢測，用血量少，非常方便。
對于同一實驗室的不同類型的血細胞分析儀，定期進行比對試驗是保證其檢測結(jié)果準確性的重要手段，正確評價和合理使用血細胞分析儀，對提高臨床檢驗質(zhì)量和工作效率起著積極作用。
參考文獻
【關(guān)鍵詞】血細胞分析儀；校準；誤差
全自動血細胞分析儀快速、方便、精確度高，是人工無法替代的阻抗法三分群。血液分析原理是溶血素破壞RBC后，根據(jù)白細胞體積大小通過計數(shù)通道時所產(chǎn)生的脈沖大小來對WBC進行分類計數(shù)。顯微鏡下計數(shù)WBC是在油鏡下通過觀察細胞大小、形態(tài)、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點，胞漿的著色特點，有無核仁等對白細胞進行分類。不同的儀器直方圖是不同的，但只要是白細胞直方圖出現(xiàn)R1、R2、R3報警，都要進行形態(tài)學復(fù)檢。異常白細胞直方圖只是讓檢驗者粗略判別各類白細胞比例或有無明顯異常細胞，進而進行形態(tài)學復(fù)查時注意這些變化的真正意義，而不能僅憑白細胞直方圖的變化來進行診斷。血液分析儀只對典型的血液病做出提示性診斷，以便作進一步檢查。如果使用不配套的試劑導致直方圖不典型或?qū)缶莆詹粔?，就會忽視血涂片造成漏檢甚至誤檢。
1資料與方法
1.1樣本來源：健康人及臨床患者新鮮抗凝全血(EDTA-K2，抗凝真空負壓采血管采集)。
1.2方法：儀器校準：用校準參考儀器MEK7222-K型血細胞分析儀之進口原裝配套校準品對其進行校準，再在該儀器上將健康人新鮮抗凝全血連續(xù)測定11次，棄去第1次結(jié)果，計算其余10次各指標之均值作為新鮮血參考定值。用此定值新鮮血代替校準品對BC-5500及ABX-60兩臺血細胞分析儀進行校準(樣本采集到校準完成4小時內(nèi)結(jié)束)。
1.3比對試驗：選取臨床患者高、中、低值5份新鮮抗凝全血在上述校準后的各臺儀器上與其他樣本一同測定(測平行樣取均值)。以MEK7222-K型血細胞分析儀所測結(jié)果為標準，分別計算BC-5500及ABX-60兩臺血細胞分析儀所測結(jié)果之偏差(CV%)。
2結(jié)果
用新鮮血校準的BC-5500、ABX-60兩臺血細胞分析儀之檢測結(jié)果與校準參考儀器MEK7222-K分析儀之檢測結(jié)果配對比較t檢驗，均為P＞0.05，表明差別無顯著性意義；RDW最大CV值為3.8%，PLT最大CV值為6.9%，MPV最大CV值為14.6%，其余各項指標CV值均＜3.0%，五項基礎(chǔ)指標之偏差均小于衛(wèi)生部臨檢中心允許的可接受范圍：WBC＜2.8%、RBC＜2.5%、HGB＜2.0%、HCT＜2.6%、PLT＜6.9%。
3討論
血細胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標，其結(jié)果的準確與否直接影響到多種疾病的診療。全自動血細胞分析儀由于計數(shù)準確，精密度高，操作簡便、快速，因而發(fā)展迅速，已逐漸取代傳統(tǒng)手工方法，成為臨床實驗室的主要檢測手段。但由于生產(chǎn)血細胞分析儀的廠家多，各自使用的測定原理和方法不盡相同，導致其測定結(jié)果及參考范圍有所差異。國內(nèi)各醫(yī)院使用不同廠家和型號的血細胞分析儀已成為普遍現(xiàn)象，致使分析結(jié)果呈現(xiàn)不同程度的差異，給臨床跟蹤觀察與對比帶來困難。
血細胞分析結(jié)果只有直接或間接地溯源至參考方法，才能保證檢測結(jié)果的正確性和不同儀器間結(jié)果的可比性。血細胞分析儀校準品是權(quán)威部門認可的標準物質(zhì)，只能用于與之配套的同一品牌型號的儀器，由于其價格昂貴、有效期短、進口入關(guān)手續(xù)復(fù)雜而不能及時獲得等問題，使其難以在實驗室推廣。
所謂自動血細胞分析儀實際上就是一臺比較器，它將實測數(shù)據(jù)與校準數(shù)據(jù)進行比較，繼而得出檢測標本的分析結(jié)果。由此可見，校準物在儀器測定結(jié)果的準確是否上起到?jīng)Q定性作用。最好的校準品是經(jīng)ICSH推薦的參考方法定值的新鮮人體血液：①氰化高鐵血紅蛋白法測定血紅蛋白(HGB)。②微量紅細胞壓積法測定紅細胞比容(HCT)。微量計數(shù)板手工計數(shù)RBC和WBC。③相差顯微鏡計數(shù)血小板，該新鮮血適用于各種型號儀器的校準。有報道可購買一臺性能最佳血細胞分析儀之配套校準品校準該儀器，再以該儀器作為校準參考儀器取得新鮮血各項參數(shù)用于其他多臺儀器的校準。上述比對結(jié)果顯示：用新鮮血校準的BC-5500及ABX-60兩臺血細胞分析儀與校準參考儀器MEK7222-K分析儀各參數(shù)間進行配對資料t檢驗，均為P＞0.05，表明差別無顯著性意義；五項基礎(chǔ)指標之CV值均小于衛(wèi)生部臨檢中心允許的可接受范圍：尤以WBC、RBC、HGB、HCT四項指標的符合性最好。因EDTA-K 2抗凝血中，血小板體積不穩(wěn)定，隨時間延長而增大，可能是導致PLT、MPV偏差較大的主要原因。
實驗結(jié)果證明，用配套校準品校準一臺性能最佳血細胞分析儀，再用新鮮血在該儀器上取得參數(shù)后去校準其他多臺分析儀可取得滿意結(jié)果，該方法既簡便易行又經(jīng)濟實用。
參考文獻
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［2］葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜,等.全國臨床檢驗操作規(guī)程.南京:東南出版社,2006:47-81.
［3］顧可梁,陳軍浩,谷俊俠,等.醫(yī)學實驗診斷學進展.南京:東南大學出版社,2000:47-53.
【關(guān)鍵詞】 SYSMEX XT-1800i血細胞分析儀； 紅細胞平均體積； 小紅細胞； 血小板計數(shù)
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.28.043
隨著科學技術(shù)的高速發(fā)展，血細胞分析儀在臨床上得到了普遍應(yīng)用。其速度快、易操作、功能強為臨床提供了不同層次有效的血細胞參數(shù)，為血細胞計數(shù)的篩查方法。但由于其檢測原理的局限性，使結(jié)果易受多種因素影響，血小板結(jié)果偏高是常見的問題。SYSMEX XT-1800i血細胞分析儀應(yīng)用庫爾特原理，采用電阻抗法進行細胞計數(shù)。當體積大小不等的血細胞通過儀器計數(shù)小孔時，引起小孔內(nèi)、外電流和電壓的變化，形成與血細胞數(shù)量相當，體積大小相應(yīng)的脈沖變化，從而間接地區(qū)分出血細胞。血小板與紅細胞計數(shù)區(qū)域常有交叉，體積偏小的紅細胞其脈沖信號可能被視為血小板信號，造成血小板計數(shù)假性增高[1]。為了解電阻抗法小紅細胞對血小板計數(shù)的影響，筆者按紅細胞平均體積的大小分類，比較電阻抗法與顯微鏡法血小板計數(shù)的差異，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇2011年5-11月本院門診及住院的180例患者。按MCV大小進行分組，第一組MCV 70~81.9 fl，第二組MCV 60~69.9 fl，第三組MCV
1.2 儀器與試劑 血細胞分析儀：采用日本SYSMEX XT1800i全自動分析儀及原裝配套試劑與質(zhì)控物。手工法：雙目顯微鏡，改良牛鮑計數(shù)板，試劑為1%草酸銨稀釋液，按全國臨床檢驗技術(shù)操作規(guī)程第3版配置[2]。
1.3 檢測方法 在空腹狀態(tài)下，抽取患者靜脈血2 ml，加入含EDTA-K2抗凝劑的真空試管中，輕輕搖勻，在2 h內(nèi)檢測完畢。檢測標本前，每日用儀器原裝質(zhì)控物做質(zhì)控，保證儀器在控的前提下檢測患者標本。儀器檢測標本的同時進行顯微鏡計數(shù)，用毛細吸管抽取20 μl靜脈血加入0.38 ml草酸銨稀釋液中，搖勻后滴入計數(shù)板，室溫靜置后，經(jīng)有經(jīng)驗的工作人員計數(shù)兩次取平均值。
1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 10.0軟件進行統(tǒng)計學處理，計量資料以(x±s)表示，采用t檢驗，以P
2 結(jié)果
MCV 70~81.9 fl時，儀器法與手工法比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。MCV 60~69.9 fl時，儀器法與手工法比較差異有統(tǒng)計學意義(P
3 討論
血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標之一，也是手術(shù)前必要檢查的項目。臨床上很多疾病都能引起血小板的增高，如慢性粒細胞性白血病、原發(fā)性血小板增多癥、真性紅細胞增多癥。一些疾病還可引起血小板反應(yīng)性增高，如急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等。因此，血小板檢測結(jié)果的可靠性至關(guān)重要。
SYSMEX XT-1800i全自動血細胞分析儀采用電阻抗原理，根據(jù)顆粒的大小來區(qū)別細胞，與顆粒的性質(zhì)無關(guān)。紅細胞和血小板同在一個檢測通道，儀器把2~30 fl范圍的細胞判定為血小板，而將25~250 fl范圍的細胞判定為紅細胞，因而紅細胞與血小板之間存在計數(shù)的交叉區(qū)域。當紅細胞體積正常時，與血小板體積懸殊很大，不會干擾血小板計數(shù)。紅細胞體積偏小時，儀器會將小紅細胞誤認為血小板，使血小板假性升高。而且MCV越小，對血小板計數(shù)影響越大，血小板計數(shù)假性增高就越多[3]。臨床上最常見的小細胞性貧血有缺鐵性貧血、地中海性貧血。紅細胞分布寬度(RDW)是紅細胞體積異質(zhì)性參數(shù)，反應(yīng)紅細胞體積大小不一致的程度。MCV 70~81.9 fl，RDW異常時，小紅細胞比例增加，血小板假性升高。當患者標本中的小紅細胞增多時，血小板相應(yīng)參數(shù)PDW、P-LCR、PCT不出結(jié)果，儀器報警提示血小板分布異常，直方圖右側(cè)抬高，不與橫坐標重合甚至平行，呈拖尾狀，這是因為小紅細胞的脈沖被誤認為血小板，而體積又比血小板大的原因[4]。
綜上所述，電阻抗法檢測血小板時，容易受小紅細胞干擾。在實際操作過程中，檢驗人員應(yīng)掌握儀器的原理，觀察圖形及報警，出現(xiàn)MCV小于70 fl或MCV在70~81.9 fl之間而RDW大于14.5%時，應(yīng)及時顯微鏡復(fù)檢，減少血小板計數(shù)誤差，提高檢驗結(jié)果的準確性和可靠性。
參考文獻
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[3] 王勛松，張宇晴.小紅細胞對BC-5500血細胞分析儀血小板計數(shù)的影響[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2010，4(7)：737-738.
為了解我室?guī)着_血細胞分析儀的性能，并為今后的室內(nèi)及室間質(zhì)量控制方案做準備，筆者采用新鮮血對本室?guī)着_血細胞分析儀做了比對實驗，現(xiàn)報道如下。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑：血細胞分析儀共3臺，其中Pentra-60 1臺
（ABX公司），ACT-diff2 1臺（BECKMAN公司），F(xiàn)-820 1臺（Sysmex公司），所有儀器都使用配套試劑，全血質(zhì)控物（四川邁克公司批號090515F）。
1.2 標本收集
1.2.1 每天隨機選取臨床病人新鮮靜脈抗凝血小板（EDTA-K2抗凝）。
1.2.2 選取我院體檢正常者新鮮抗凝血標本（EDTA-K2抗凝）。
1.3 方法
1.3.1 儀器穩(wěn)定性監(jiān)控：每臺儀器每日以全血質(zhì)控物做室內(nèi)質(zhì)控（批間精密度），并依據(jù)室內(nèi)質(zhì)控做隨程監(jiān)控。分別計算參數(shù)WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
1.3.2 儀器精密度測定：取正常人新鮮抗凝靜脈血1份，分別在每臺儀器重復(fù)測定10次，計算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值，SD和CV。
1.3.3 比對儀器的確定：根據(jù)我室的具體情況，依據(jù)室內(nèi)質(zhì)控，選定Pentra-60（ABX）為參考比對儀器，其他2臺為測試儀器。
1.3.4 比對實驗：每日用2.1所采集的標本4份，在3臺儀器上分別進行測試，連續(xù)26天，比較測試儀器和參考比對儀器的測定結(jié)果，包括WBC、RBC、PLT、HGB、HCT。
1.4 統(tǒng)計處理
1.4.1 對各個儀器與參考比儀器結(jié)果做回歸和相關(guān)分析，求其相關(guān)系數(shù)r及回歸方程y=bx+a，然后根據(jù)回歸方程求x在允許誤差內(nèi)的取值范圍，即有效檢測范圍，查閱相關(guān)文獻后，參考美國CLIA’88能力比對檢驗質(zhì)量要求和國際血液學標準化委員會及NCCLS制定的標準設(shè)定允許誤差為：WBC：±5%，RBC：±2%，PLT：±9%，HGB：2%，HCT：±2%。
1.4.2 以參考范圍為界限（RBC為3.5～5.5×109/L，WBC為4～10×109/L，HGB為110～160 g/L，HCT為0.37～0.55L/L,PLT為100～300×109/L）[2]，低于參考值為低值，高于正常參考范圍為高值，在參考范圍內(nèi)為中間值，以參考比對儀器高中低值區(qū)段均值為測定值，計算各測試儀器相對參考比對儀器的變異百分率%=│測定值-正確值│正確值×100。
2 結(jié)果
2.1 從各儀器試驗期間室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果可知CV%不大于5%，見表1，顯示各儀器在實驗期間性能穩(wěn)定。
2.2 各儀器分析項目的批間精密度都在廠家規(guī)范范圍內(nèi)，見表2。
2.3 比對儀器與其他2臺儀器相關(guān)分析見表3，回歸方程經(jīng)方差分析推斷直線關(guān)系成立，P>0.05。
2.4 根據(jù)回歸方程Y=bx+a和設(shè)定的允許誤差范圍計算的有效測試范圍見表4。
2.5 兩臺測試儀器與對比儀器測定值間的變異百分率見表5。
3 討論
3.1 從各比對項目來看，我室ACT和F820兩臺測試儀器中，ACT和比對儀器有較好的符合性，一般在臨床應(yīng)用上可以相互替換，但是在某些較低值時，見表4，WBC
3.2 F820的實驗結(jié)果就不盡人意了，可能是年代久遠的緣故（使用了8年），WBC在高于5.39×109/L時結(jié)果就會超過允許誤差，分區(qū)段計算的結(jié)果，見表5，也顯示在高值時的變異百分率8.87也超過5%，此外HCT和PLT也存在著較大偏差，需檢測一下F820的WBC、PLT、HCT的檢測系統(tǒng)，其中HCT有一定的影響，PLT在
3.3 在做相關(guān)分析時，相關(guān)系數(shù)R均大于0.99，見表3，但是利用回歸方程計算有效檢測范圍和高中低區(qū)段計算時仍有超出允許誤差的現(xiàn)象出現(xiàn)，此前有相關(guān)報道只利用相關(guān)系數(shù)來判定兩儀器的測定結(jié)果是否可以互換使用，這是不行的。所以在此次實驗中選用了這種方法來比較結(jié)果，可能會更準確一些。